22qll微缺失检测在产前诊断中的应用价值

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  • 更新时间2015-09-16
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陆林苑 唐海深 江陵

【摘要】目的 探讨22q11微缺失检测在产前诊断领域中的应用价值。 方法 应用染色体荧光原位杂交(FISH)技术,对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇进行产前22q11微缺失的检测。 结果55例产前诊断病例中,22q11微缺失2例,均为胎儿心脏室间隔缺损。结论对于先天性心脏病的胎儿应行产前诊断检测22q11微缺失。

【关键词】22q11微缺失 先天性心脏病 荧光原位杂交技术

doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2014.09.029

先天性心脏畸形是一种多病因的疾病,是由遗传和环境因素决定的。在22q11微缺失综合征患者中有75%伴有各类先天性心脏病。 BRETELLE等[1]认为先天性心脏病是22q11微缺失综合征最常见的诊断原因。目前国内22q11微缺失检测多应用于患儿的回顾性研究,本研究前瞻性应用于产前诊断标本中:应用染色体荧光原位杂交(FISH)技术,对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇进行产前22q11微缺失的检测。

1资料与方法

1.1研究对象

2011年5月~2013年12月期间,南方医科大学附属中山市博爱医院产前诊断中心产前诊断病例中行22q11微缺失检测的55例胎儿,胎龄12~32周,行绒毛膜穿刺1例,羊膜腔穿刺21例,脐带血穿刺33例。55例孕妇中,包括:25例为已生育(或引产)过一个先天性心脏病、面容畸形患者的孕妇,本次妊娠胎儿超声未见心脏或面容畸形;4例超声高度怀疑胎儿为唇裂或唇腭裂;26例超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病者,见表1。

1.2方法

对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇,先行病史询问及体格检查,再行血尿常规、凝血功能、肝功能和乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、心电图等常规检查。行介入性产前诊断的孕妇抽取绒毛2~3枝,或羊水5 ml,或脐血1.0 ml。应用荧光原位杂交技术(FISH),采用金菩嘉医疗科技有限公司DiGeorge/VCFS 综合症检测试剂盒,检测标本中22号染色体上TUPLE1基因微缺失情况。检测基因名称为GLP TUPLE1/GLP ARSA,探针位点TUPLE1:22q11,ARSA:22q13。TUPLE1探针杂交到22q11.21,荧光信号为红色(四甲基罗丹明),ARSA基因探针杂交到22q13.31,荧光信号为绿色(细胞绿),两者互为内对照探针。TUPLE1和ARSA 基因互为内对照。FISH信号的判读:TUPLE1异常比例超过60%为阳性。随访。

2结果

全部55例标本中,25例为已生育或引产过一个先天性心脏病或面容畸形患者的孕妇,本次妊娠胎儿B超未见异常,产前诊断22q11微缺失检测均未见异常;4例声超高度怀疑胎儿为唇裂或唇腭裂的胎儿产前诊断22q11微缺失检测均未见异常;26例超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病的胎儿中,产前诊断24例22q11微缺失检测见异常,22q11微缺失2例,见表2。

全部55例标本同时行胎儿染色体检查均未发现异常。2例有22q11微缺失的胎儿中,其中1例胎儿的父亲也进行了外周血FISH检测,为22q11微缺失携带者,无临床症状,拒绝进一步检查。另一例胎儿的双亲无临床症状,拒绝行22q11微缺失检测。对所有55例病例进行随访,随访结果见表3。

3讨论

随着心脏外科手术的进展,许多先心儿得到手术救治。但是,有一些家庭在孕期发现胎儿心脏异常后,查胎儿染色体无异常,在患儿出生后经手术治疗,花费数十万元以后,才发现孩子还患有22q11 微缺失综合征,表现为免疫功能下降、语言障碍、学习能力低下,精神异常等。这对社会和家庭造成更大的伤害。故产前诊断工作的一个重点,不但是早日诊断出胎儿是否患先心,而且要更准确地评估胎儿的远期预后。

22q11微缺失综合征是迄今为止少数已明确的先心病因之一。22q11微缺失区域位于D22S427/1638和D22S306/308之间,大小为1.5~3 Mb。目前普遍认为,缺失发生的原因是染色体减数分裂后重组时出现不对称和异常[2]。在新生活产儿中发病率为1/4 000[3],其主要表现为DiGeorge综合征(DGS):甲状旁腺发育不全、胸腺发育不全和锥干型心脏畸形(CTD);腭-心-面综合征(VCFS):腭裂、面容畸形等; 22q11微缺失表型广泛多样,且常合并低钙血症,免疫功能缺陷,严重影响患儿的治疗及预后[4]。通过荧光原位杂交技术(FISH)检测绒毛、羊水或脐血中的TUPLE1基因,有助于判断胎儿是否发生22号染色体微缺失。从而有助于提高遗传咨询的准确性,可以及早进行临床干预及再发风险评估,达到优生优育的目的。

本研究55例病例中检测到2例阳性(2/55),阳性率与最近的相关报道(2/53)一致[5]。本研究2例阳性病例均为胎儿心脏室间隔缺损,提示22q11 微缺失与室间隔缺损相关性大,2例阳性胎儿均引产,未行尸检,可能存在超声难以发现的其他心外畸形。既往有报道主动脉弓离断、法洛四联症等异常常合并有胸腺发育不良,是染色体22q11缺失综合征的表现[3]。本研究2例法氏四联症胎儿及1例永存动脉干胎儿结果均阴性,可能与标本量有限有关。

本研究2例有22q11微缺失的胎儿中,其中1例胎儿的父亲也进行了外周血FISH检测,为22q11微缺失携带者,无临床症状,拒绝行进一步心脏彩超检查,提示携带22q11 微缺失也有表型正常的病例,为临床遗传咨询提供依据。本研究24超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病的胎儿中,没有检测到染色体异常和22q11微缺失。这一结果支持先心病的发生是多基因与环境因素相互作用的结果。

有研究显示,对已经出生的22q11缺失综合征的患者一般采取的治疗方式为:心脏畸形多采用手术对症治疗;低钙血症通常补钙治疗;胃食管返流通过抗酸、促胃动力治疗;腭异常者通过颅面手术矫形治疗;婴儿存在淋巴系统异常者应避免接种活疫苗,少数情况下,可预防性使用抗生素,静脉注射免疫球蛋白或胸腺移植。对运动、认知、语言发育迟缓者进行早期教育干预及在1岁时进行语言治疗来控制或治疗[4]。

参考文献

[1]BRETELLE F, BEYER L, PELLISSIER MC, et al. Prenatal and post-natal diagnosis of 22q11.2 deletion syndrome[J]. Eur J MedGenet, 2010, 53(6):367-370.

[2]王凤羽,马林先.先天性心脏病患儿22q11 微缺失的临床研究[J].中国计划生育学杂志,2012,20(2):109-113.

[3]李胜利.胎儿先天性心脏病的筛查和诊断[J]. 中国实用妇科与产科杂志,2010,26(12):920-922.

[4]杨文娟,吴青青. 胎儿畸形与22q11微缺失相关性的研究进展[J]. 中国妇产科临床杂志,2011, 12(2):151-153.

[5]常新瑞,任淑梅. 先天性心脏病患儿染色体情况分析[J]. 现代中西医结合杂志,2011, 20(5):605.